Nationalles Konsiliarlaboratorium für Adenoviren Adenoviren Konsiliarlabor und Diagnostik Virustypisierung Forschung und Publikationen Externe Links for Studenten und Wissenschaftleren
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Nationalles Konsiliarlaboratorium
Seit 1988 befindet sich das deutsche Referenzlabor für Adenoviren (später: Konsiliarlabor) am Institut für Virologie der MHH. Das Labor und die zugehörige Forschergruppe wurden von Herrn Dr. Adrian begründet und von Dr. Pring-Akerblom bis ins Jahr 2000 weitergeführt. Neben Typisierungsaufgaben stand zuerst die Entwicklung der Genotypisierung im Vordergrund. Anschließend wurden verschiedene PCR Verfahren zum genus-, subgenus- und speciesspezifischen Nachweis von Adenoviren entwickelt. Forschungsprojekte waren die Strukturabklärung von Adenoviren sowie die Bestimmung von Rezeptorbindungsstellen und Hämagglutinationdeterminanten. In einem neueren Forschungsprojekt wurde die Viruslastkinetik bei disseminierten Adenovirusinfektionen in immunsupprimierten Patienten untersucht.


Mitglieder der Arbeitsgruppe

PD Dr. med. Albert Heim
    +49 511 532 4327,4311 | Heim.Alber@MH-Hannover.De

PD Dr. med. rer. nat Pring-Åkerblom (inzwischen als externe Beraterin)
    +49 511 532 4327,4311 |

Gabriele Harste, MTA
    +49 511 532 4327 | Harste.Gabriele@MH-Hannover.De

Rüdiger Stock, Doktorand

Tobias Wilhelm, Doktorand

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Adenoviren Konsiliarlabor und Diagnostik

Die folgenden Diagnostikmethode stehen zur Verfügbar:

Komplementbindungsreaktion - KBR
Neutralisationstest* - NT
Virusanzucht - Anz
Qualitative PCR (generisch) - PCR
Viruslastassay (Quantitative PCR, generisch) * - qPCR
molekulare Typisierung (durch Sequenzierung

* bitte telefonische Rücksprache vor Einsendung
Komplementbindungsreaktion - KBR
Serologische Methode zum Nachweis von frischen Adenovirusinfektionen. Einfacher serologischer Test

Benötigtes Material: Serum oder Vollblut
bevorzugt: Probenpaar, eine Probe entnommen vor oder unmittelbar nach Beginn der Symptomatik und eine weitere Probe mindestens eine Woche später

Neutralisationstest* - NT
Durch Neutralisationsteste kann man den Serostatus von Patienten gegenüber einem bestimmten Adenovirustypen bestimmen. Das Verfahren ist besonderen Fragestellungen vorbehalten und wird nur nach Rücksprache durchgeführt

Benötigtes Material: Serum oder Vollblut
bevorzugt: Probenpaar, eine Probe entnommen vor oder unmittelbar nach Beginn der Symptomatik und eine weitere Probe mindestens eine Woche später

* bitte telefonische Rücksprache vor Einsendung
Virusanzucht - Anz
Die Virusisolierung (Anzucht) auf Zellkulturen ist die Referenzmethode für den Nachweis von Adenovirusinfektionen. Sie ist jedoch zeitaufwendig und deshalb wird in vielen Fälle die PCR als Ersatz bevorzugt. Wir halten auch spezielle Zelllinien für die Anzucht von enteralen Adenoviren vorrätig.

Benötigtes Material: Augenabstriche, Nasen- Rachen- und andere ähnliche Abstriche, Rachenspülwasser, bronchoalveoläre Lavage, Trachealsekret, Stuhl, Biopsien, Urin.
EDTA-Blut, Serum, Plasma und Liquor solten immer primär mit einer quantitativen PCR untersucht werden.

Qualitative PCR (generisch) - PCR
Durch PCR kann Adenovirus DNA schnell, sensitiv und sicher in einer Vielzahl von klinischen Materialien (und auch Umweltproben) nachgewiesen werden und damit der Nachweis einer Adenovirusinfektion geführt werden

Benötigtes Material: Augenabstriche, Nasen- Rachen- und andere ähnliche Abstriche, Rachenspülwasser, bronchoalveoläre Lavage, Trachealsekret, Stuhl, Biopsien, Urin.
EDTA-Blut, Serum, Plasma und Liquor werden von uns mit einer quantitativen PCR untersucht.

Viruslastassay (Quantitative PCR, generisch)* - qPCR
Durch quantitative PCR kann Adenovirus DNA nicht nur nachgewiesen, sondern auch die Viruslast im Blut bestimmt werden. Dies ist sehr hilfreich für die zuverlässige Diagnose einer disseminierten Adenovirus-Infektion bei Immunsupprimierten.

Benötigtes Material: (EDTA-)Blut, Serum, Plasma
Auch Liquor wird mit der quantitativen PCR untersucht, für die Diagnose einer Adenovirus Meningitis ist aber eine quantitative Aussage nicht erforderlich.

Molekulare Typisierung
Die molekulare Typisierung durch partielle Hexon-Sequenzierung ermöglicht eine schnelle Typbestimmung. Wir verwenden hierzu ein selbst entwickeltes Zwei-Stufen Verfahren. Falls Sie ein Adenovirus bereits isoliert haben und wir die Typisierung durchführen sollen, kontaktieren Sie uns bitte. Außerdem sind dadurch auch Typbestimmungen direkt aus diagnostischen Patientenmaterialien möglich (ohne vorherige Virusisolation). Für Sonderfälle stehen auch verschiedene andere Techniken zur Virustypisierungzur Verfügung: Schnelltypisierung / Specieszuordnung (multiplex PCR)* - mPCR, Genotypisierung durch Resriktionsanalyse* - GT, ergänzende Fiber Sequenzierung* - Seq, Typisierung (Serotypisierung durch Neutralisation)* - Typ

* bitte telefonische Rücksprache vor Einsendung

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Virustypisierung
Verschiedene Techniken zur Virustypisierung stehen zur Verfügung. Falls Sie ein Adenovirus bereits isoliert haben und wir die Typisierung durchführen sollen, kontaktieren Sie uns bitte. Je nach Ihren Anforderung können wir dann aus den vier möglichen Methoden die für Ihre Zwecke am besten geeignete Methode auswählen. Außerdem ist mit Hilfe der Multiplex PCR oder der Sequenzierung von PCR Produkten auch eine direkte Differenzierung von Adenovirus DNA in Patientenmaterialien ohne vorherige Virusisolation möglich.

Schnelltypisierung / Specieszuordnung (multiplex PCR) - mPCR
Genotypisierung (Resriktionsanalyse)* - GT
Typisierung durch Hexon und Fiber Sequenzierung - Seq
Typisierung (Serotypisierung)* - Typ

* bitte telefonische Rücksprache vor Einsendung
Bereitstellung von Adenovirus-Prototypstämmen
Falls Sie für Ihre Forschung oder Diagnostik Adenovirus Prototypstämme benötigen, können wir Ihnen diese zur Verfügung stellen. Voraussetzung ist natürlich, dass Sie eine entsprechende Umgangsgenehmigung nach IFSG haben. Auch können wir Ihnen (in beschränktem Umfang) 293 "Graham" Zellen und A549 Zellen zur Verügung stellen. Bitte kontektieren Sie uns wegen Details
Beratung und Hilfe bei der Adenovirusdiagnostik und Epidemiologie
Bei Fragen zu diagnostischen Methoden und Möglichkeiten sowie zur epidemiologie und klinischen Bedeutung von Adenovirusinfektionen versuchen wir gerne Kollegen zu halfen. Bitte zögern SIe nicht uns zu kontaktieren.

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Publikationen

Heim A, Ebnet C, Harste G, Pring-Åkerblom. "Rapid and Quantitative Detection of Human Aenovirus DNA by Real-Time PCR" J Med Virology, 2003 70:228-239

Arnberg N, Kidd AH, Edlund K, Nilsson J, Pring-Akerblom P, Wadell G. "Adenovirus type 37 binds to cell surface sialic acid through a charge-dependent interaction." Virology. 2002 Oct 10;302(1):33-43.

Arnberg N, Pring-Akerblom P, Wadell G. "Adenovirus type 37 uses sialic acid as a cellular receptor on Chang C cells." J Virol. 2002 Sep;76(1 7):8834-41.

Blusch JH, Deryckere F, Windheim M, Ruzsics Z, Arnberg N, Adrian T, Burgert HG. "The novel early region 3 protein E3/49K is specifically expressed by adenoviruses of subgenus D: implications for epidemic keratoconjunctivitis and adenovirus evolution." Virology. 2002 Apr 25;296(1):94-106.

Cichon G, Boeckh-Herwig S, Schmidt HH, Wehnes E, Muller T, Pring-Akerblom P, Burger R. "Complement activation by recombinant adenoviruses." Gene Ther. 2001 Dec;8(23):1794-800.

Pring-Akerblom P, Trijssenaar FE, Adrian T, Hoyer H. "Multiplex polymerase chain reaction for subgenus-specific detection of human adenoviruses in clinical samples." J Med Virol. 1999 May;58(1):87-92.

Grumbach IM, Heim A, Pring-Akerblom P, Vonhof S, Hein WJ, Muller G, Figulla HR. "Adenoviruses and enteroviruses as pathogens in myocarditis and dilated cardiomyopathy." Acta Cardiol. 1999 Apr;54(2):83-8.

Liebermann H, Mentel R, Bauer U, Pring-Akerblom P, Dolling R, Modrow S, Seidel W. "Receptor binding sites and antigenic epitopes on the fiber knob of human adenovirus serotype 3." J Virol. 1998 Nov;72(11):9121-30.

Pring-Akerblom P, Heim A, Trijssenaar FE. "Molecular characterization of hemagglutination domains on the fibers of subgenus D adenoviruses." J Virol. 1998 Mar;72(3):2297-304.

Eiz B, Pring-Akerblom P. "Molecular characterization of the type-specific gamma-determinant located on the adenovirus fiber." J Virol. 1997 Sep;71(9):6576-81.

Pring-Akerblom P, Blazek K, Schramlova J, Kunstyr I. "Polymerase chain reaction for detection of guinea pig adenovirus." J Vet Diagn Invest. 1997 Jul;9(3):232-6.

Pring-Akerblom P, Adrian T, Kostler T. "PCR-based detection and typing of human adenoviruses in clinical samples." Res Virol. 1997 May-Jun;148(3):225-31.

Pring-Akerblom P, Heim A, Trijssenaar FE. "Conserved sequences in the fibers of epidemic keratoconjunctivitis associated human adenoviruses." Arch Virol. 1997;142(1):205-11.

Eiz B, Adrian T, Pring-Akerblom P. "Recombinant fibre proteins of human adenoviruses Ad9, Ad15 and Ad19: localization of the haemagglutination properties and the type-specific determinant." Res Virol. 1997 Jan-Feb;148(1):5-10.

Adrian T. "Genome polymorphism of human adenoviruses of subgenus C." Arch Virol. 1996;141(6):1021-31.

Eiz B, Adrian T, Pring-Akerblom P. "Immunological adenovirus variant strains of subgenus D: comparison of the hexon and fiber sequences." Virology. 1995 Nov 10;213(2):313-20.

Pring-Akerblom P, Trijssenaar FE, Adrian T. "Hexon sequence of adenovirus type 7 and comparison with other serotypes of subgenus B." Res Virol. 1995 Nov-Dec;146(6):383-388.

Pring-Akerblom P, Trijssenaar FE, Adrian T. "Sequence characterization and comparison of human adenovirus subgenus B and E hexons." Virology. 1995 Sep 10;212(1):232-6.

Pring-Akerblom P, Adrian T. "Sequence characterization of the adenovirus 31 fibre and comparison with serotypes of subgenera A to F." Res Virol. 1995 Sep-Oct;146(5):343-54.

Pring-Akerblom P, Adrian T. "Characterization of adenovirus subgenus D fiber genes." Virology. 1995 Jan 10;206(1):564-71.

Pring-Akerblom P, Adrian T. "Type- and group-specific polymerase chain reaction for adenovirus detection." Res Virol. 1994 Jan-Feb;145(1):25-35.

Pring-Akerblom P, Adrian T. "The hexon genes of adenoviruses of subgenus C: comparison of the variable regions." Res Virol. 1993 Mar-Apr;144(2):117-27.

Adrian T, Brunnemann H, Wigand R. "Adenovirus isolations from patients with conjunctivitis in Thuringia." Zentralbl Bakteriol. 1993 Feb;278(1):127-31.

Adrian T. "Genome type analysis of adenovirus type 4." Intervirology. 1992;34(4):180-3.

Adrian T, Wigand R. "Restriction site mapping of subgenus D adenoviruses, prototypes 42-47, intermediate and atypical strains." Zentralbl Bakteriol. 1991 Dec;276(1):107-19.

Wigand R, Adrian T. "A rational system for classifying and denominating adenovirus genome types." Res Virol. 1991 Jan-Feb;142(1):47-56.

Adrian T, Wolf U, Lauer HJ, Wigand R. "Restriction site mapping of adenovirus type 8 genome types." Res Virol. 1990 Nov-Dec;141(6):611-24.

Adrian T, Sassinek J, Wigand R. "Genome type analysis of 480 isolates of adenovirus types 1, 2, and 5." Arch Virol. 1990;112(3-4):235-48.

Wigand R, Adrian T. "Restriction site mapping of adenovirus prototypes of subgenus D." Med Microbiol Immunol (Berl). 1990;179(2):67-75.

Adrian T, Wolf U. "Adenovirus 6 genome types: mapping of restriction site alterations on the genome." Res Virol. 1989 Nov-Dec;140(6):545-50.

Adrian T, Schlipkoter U, Roggendorf M, Wigand R. "Nosocomial and endemic infections with a genome type of adenovirus type 5." Zentralbl Bakteriol. 1989 Sep;271(3):339-44. PMID: 2553041 [PubMed - indexed for MEDLINE]

Adrian T, Best B, Hierholzer JC, Wigand R. "Molecular epidemiology and restriction site mapping of adenovirus type 3 genome types." J Clin Microbiol. 1989 Jun;27(6):1329-34.

Adrian T, Wigand R. "Genome type analysis of certain adenovirus serotypes of subgenus D." Zentralbl Bakteriol Mikrobiol Hyg [A]. 1989 Mar;270(4):527-33.

Adrian T, Wigand R, Knocke KW, Schafer G, Grundmann M. "Genome type analysis of adenoviruses: isolates from one year from the Hannover area." Arch Virol. 1989;105(1-2):89-101.

Adrian T, Becker M, Hierholzer JC, Wigand R. "Molecular epidemiology and restriction site mapping of adenovirus 7 genome types." Arch Virol. 1989;106(1-2):73-84.

Adrian T, Bastian B, Wagner V. "Restriction site mapping of adenovirus types 9 and 15 and genome types of intermediate adenovirus. "15/H9. Intervirology. 1989;30(3):169-76.

Wigand R, Adrian T. "Intermediate adenovirus strains of subgenus D occur in extensive variety." Med Microbiol Immunol (Berl). 1989;178(1):37-44.

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Externe Links

Kürze Beschreibungen der Adenoviren:

www.virology.net/garryfavweb11.html
www.uct.ac.za/depts/mmi/stannard/adeno.html
www.queensu.ca/micr/micr450/adeno.html
www.stanford.edu/group/virus/adeno/adeno.html
www.medinfo.ufl.edu/year2/mmid/bms5300/bugs/Adenovir.html
www.fda.gov/ohrms/dockets/ac/01/slides/3868s1_05_flomenberg/sld024.htm

Detaillierte Beschreibungen der Adenoviren für Studenten und Wissenschaftleren:

Ausführliche Molekularvirologie
www.vu-wien.ac.at/i123/SPEZVIR/ADENOGEN1.HTML

www.uq.edu.au/vdu/Adenovirus.htm (englisch)

ICTV taxonomic information
www.ncbi.nlm.nih.gov/ICTVdb/ICTVdB/01000000.htm

Lots of data and links
www.nlv.ch/Adenovirus/Adenofactsheet.htm

Für Wissenschaftleren:

A review about adenovirus vectors in gene therapy:
www.socgenmicrobiol.org.uk/JGVDirect/17217/17217ft.htm

A special blast service for adenovirus sequences:
www.vmri.hu/blast.htm

A visual sequence database:
www.vmri.hu/~harrach/ADENOSEQ.HTM

A general taxonomy based sequence browser:
www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=Taxonomy

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